• HEPES 的中文名称：
  
  
  
• 酚红的作用：

　　酚红在培养基中被用来作为pH值的指示剂，但是酚红具有一定的固醇类激素样作用，如雌激素样作用，尤其对于所培养的哺乳类动物细胞，可能发生的固醇类反应不可忽视。 为了避免酚红干扰检测结果，许多研究人员视情况不同来选择是否使用含酚红的培养基。

• 双抗降解产生的细胞毒：
  
• 培养基中丙酮酸钠的作用：

　　细胞通常以葡萄糖作为碳源，丙酮酸钠可以作为细胞培养中的替代碳源。如果没有足够的葡萄糖供应，细胞就会选择丙酮酸钠作为代谢底物。

• Hank’s 缓冲体系与Earle’s体系的功能差别：

　　二者的主要差别在于碳酸氢钠的水平， Eagle‘s 为2.2g/L，Hank’s 为0.35g/L。Earle’s体系需要较高水平的CO2 平衡，以维持溶液的pH值稳定, 如果暴露在空气中，Earle’s体系溶液会很容易变碱， 所以需要置于CO2 培养箱中平衡。Hanks液如果置于CO2 培养箱中却会变酸。所以如果使用CO2 培养箱培养细胞，需要用Eagles液。如果只在普通大气环境中清洗、培养细胞，需使用Hanks 体系液体。

• 单细胞克隆培养观察：

　　在分析筛选细胞增殖能力时，稀释培养液作单细胞培养，然后观察其克隆化增殖能力，来比较判断要筛选的组分对于细胞增殖能力的影响。 这其中需要采用 Neuronbc TM 细胞微坐标  来确定每个细胞的位置。

　　例如：首先利用固定在培养皿底部的微坐标，锁定某1个细胞的坐标；然后记录它的电生理结果、染色得到它的免疫组化、原位杂交结果，或者测定它的其它生化、功能指标；依据其坐标线索，将属于该细胞下的所有结果比较、分析，由此得到属于该细胞的多个参数之间的相关性或相互作用的信息。这比使用复杂昂贵的计算机辅助定位工具更加实用、有效。

• 培养基选用基础：

　　>> 建议的常用培养基选用指南

• 神经元无血清培养液的选择：

　　分别 用DMEM/F12 + N3，Neurobasal A + N3, Neurobasal A + B27进行大鼠海马神经元、鼠脑组织神经干细胞的培养进行比较，三组之间无明显差异。      

　　新生大鼠海马神经元种植12h后,大部分细胞贴壁呈圆形, 其中少数神经细胞开始伸出1-2个突起。培养24h后,伸出突起的神经细胞逐渐增多, 突起一般为20-40μm,长者可达60μm，无血清培养3d后, 神经元突起进一步增多并延长,形成稀疏的网络， 以锥体细胞为多见,胞体较大,直径6-12μm 。随着培养时间的延长,神经元胞体逐渐增大,胞突主干和分枝明显延长并增粗,形成更加稠密的网络，无血清培养可维持生长1个月左右。

　　Fig 1.  无血清培养新生大鼠海马神经元 15天（A ，B, NSE（+）×400）

　　分散培养新生大鼠海马神经元1个月（C ，D, NSE（+），×400）

　　摘自钮因公司内部资料

        


　　Fig2.  用DMEM/F12(1:1)培养的SD胎鼠脑组织神经干细胞

　　A：用DMEM/F12 + N3 + EGF + bFGF 培养，种植6天后出现细胞球；

　　B：加入10%FBS后细胞球内细胞移行，出现分化；

　　C：对细胞球nestin染色 (+)；

　　D：分化形成的神经元细胞Tublin染色 (+） 。

　　摘自钮因公司内部资料